擬 對昭通金江青花椒總生物堿的體外抑菌活性進(jìn)行研 究,以期為新型天然防腐劑的開發(fā)提供實驗依據(jù),也 為金江青花椒的精深加工提供理論依據(jù),共同助力 金江青花椒產(chǎn)地脫貧攻堅。青花椒:昭通市魯?shù)榭h花椒,烘干至恒重,粉碎 后過 0.250 mm 孔徑篩,于干燥器中避光保存;營養(yǎng) 肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基、PBS 緩沖液, Solarbio;金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基,海博生物; ATP 含量測定試劑盒,南京建成生物工程研究所; TD-400 臺式低速自動平衡離心機(jī),上海佑科儀器 儀表有限公司;DHP-9082 電熱恒溫培養(yǎng)箱,上海一 恒科學(xué)儀器有限公司;P1000 型移液槍,大龍興創(chuàng)實 驗儀器(北京)股份公司。
將青花椒總生物堿按 1×MIC 的比例加入對數(shù) 期的金黃色葡萄球菌菌懸液培養(yǎng)基中。以無菌水作 空白對照,將菌液和培養(yǎng)基按 1∶1 比例混勻后作為 陽性對照。設(shè)定取樣時間間隔為 1 h,將取出的樣 品在 6 000 r/min 下離心 10 min,用 PBS 洗滌并重懸 菌體三次,接著,在 300 W,間隔 1.1 s 的條件下破碎 細(xì)胞,隨后于 8 000 r/min 冷凍離心 10 min,吸取上 清液,最后,參照 ATP 測試盒的測定方法檢測樣 品中 ATP 的含量。